RNA HS Assay Kit的工作原理可以通過(guò)熒光染料選擇性結合、熒光信號的產(chǎn)生和處理、耐受性與特異性等方面來(lái)理解。以下是對工作原理的具體分析：
1.熒光染料選擇性結合：
Kit使用特定的熒光染料，這些染料具有高度選擇性，僅在與RNA結合時(shí)才會(huì )發(fā)出熒光信號。這種選擇性結合確保了該試劑盒能夠準確區分RNA和其他核酸，如DNA。
當熒光染料與RNA結合時(shí)，它會(huì )經(jīng)歷一個(gè)熒光性質(zhì)的變化，即熒光增強。這種特性使得檢測變得非常靈敏，即使是低豐度的RNA樣品也能被準確檢測到。
2.熒光信號的產(chǎn)生和處理：
一旦熒光染料與RNA結合，就會(huì )發(fā)出熒光信號。這些信號通過(guò)Qubit熒光計或兼容的熒光檢測設備讀取，并轉化為RNA濃度的數值。
Qubit儀器會(huì )計算熒光信號的強度，并將其與預先設定的標準曲線(xiàn)對比，從而得到RNA的精確濃度。此過(guò)程僅需約2分鐘即可完成，顯著(zhù)提高了實(shí)驗效率。
3.耐受性與特異性：
RNA HS Assay Kit設計時(shí)考慮了實(shí)驗中可能遇到的各種污染物，如鹽、溶劑、去污劑等。該試劑盒對這些污染物具有出色的耐受性，不會(huì )影響RNA的定量結果。
試劑盒中的熒光染料不僅與RNA特異結合，而且還能區分DNA和RNA。這一點(diǎn)對于需要準確RNA定量的下游應用尤其重要，如cDNA合成和RT-qPCR實(shí)驗。
4.靈敏度與動(dòng)態(tài)范圍：
該試劑盒能夠精準定量低至250 pg/μL的RNA樣品，檢測范圍從250 pg/μL到100 ng/μL。這使得它非常適合于低豐度RNA樣本的分析。
相比傳統的紫外吸收法，Qubit RNA HS Assay提供了更高的檢測靈敏度和更寬的定量范圍，可以顯著(zhù)降低背景噪音，從而實(shí)現對稀釋樣品的準確測量。
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