DNA建庫方法大致可分為這幾種類(lèi)型
更新時(shí)間：2022-02-21 點(diǎn)擊次數：2402
DNA分子的功能是貯存決定物種性狀的幾乎所有蛋白質(zhì)和RNA分子的全部遺傳信息，對DNA信息的解讀，對于我們研究生命的奧秘、疾病的機理等有著(zhù)重要的意義。DNA類(lèi)的文庫主要分為：DNA小片段文庫、DNA大片段文庫、Exon文庫、PCR-Free文庫和單細胞文庫等。DNA建庫方法是分子生物學(xué)的實(shí)驗原理，其本質(zhì)就是在待測片段兩端加上接頭的過(guò)程。
DNA小片段文庫是指片段大小在1kb以下的普通DNA文庫（200bp、350bp、500bp等），DNA小片段文庫可用來(lái)進(jìn)行人重測序，動(dòng)植物、微生物的de novo和重測序，16s rRNA測序，宏基因組測序等項目類(lèi)型的文庫構建。
DNA大片段文庫，又稱(chēng)之為末端配對（mate-paired）文庫，片段長(cháng)度大于1kb，主要用于動(dòng)植物，微生物的de novo測序。
PCR-Free文庫，顧名思義，就是在文庫構建過(guò)程中不需要進(jìn)行PCR的文庫。主要是針對一些特殊樣本，比如GC含量高、PCR擴增困難的樣本和PCR產(chǎn)物。不足之處在于所需的樣本起始量較少。
Exon文庫：人類(lèi)外顯子組總共約30 Mb，占人類(lèi)基因組約1%，外顯子具有高度的保守型，且大部分疾病的致病位點(diǎn)位于外顯子區。外顯子測序是指利用序列捕獲技術(shù)將外顯子區域DNA捕捉并富集后進(jìn)行高通量測序的基因組分析方法。Exon文庫主要用于人全外顯子測序和目標區域測序。
單細胞DNA文庫：隨著(zhù)二代測序技術(shù)的發(fā)展，把一次實(shí)驗測許多條DNA序列的這個(gè)難題解決之后，一次把一個(gè)人的全基因組給測出來(lái)，最極限的情況，就是樣本量少到一個(gè)細胞，就可以測出整個(gè)基因組的序列信息。
目前DNA建庫方法按照接頭連接方式不同可分為五類(lèi)：
1、PCR擴增子建庫；
2、Swift法建庫；
3、轉座酶法建庫；
4、TA克隆連接接頭建庫；
5、平末端連接接頭建庫。
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